目　录

第一篇　生物化学实验基础知识与基本技术

第一章　医学生物化学实验基本知识 2

第一节　实验室基本规则 2

第二节　实验基础知识与操作 7

第二章　电泳技术 17

第一节　电泳技术的基本知识 17

第二节　常用电泳技术 23

第三章　光谱分析技术 28

第一节　分光光度法的基本知识 28

第二节　分光光度计的结构与使用 34

第四章　离心技术 39

第一节　离心技术的原理 39

第二节　离心技术的分类 43

第三节　离心机的类型、结构及使用方法 46

第五章　层析技术 51

第一节　吸附层析 52

第二节　分配层析 57

第三节　凝胶过滤层析 60

第四节　离子交换层析 66

第五节　亲和层析 70

第六章　常用分子生物学技术 78

第一节　重组DNA技术 78

第二节　聚合酶链反应技术 87

第二篇　综合性实验

第七章　物质的分离与测定 102

实验一　醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白质 102

实验二　聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳分离血清蛋白质 106

实验三　SDS-PAGE分离血清蛋白质 111

实验四　凝胶柱层析法分离蛋白质 115

实验五　氨基酸薄层层析分离及鉴定 116

实验六　双缩脲法测定蛋白质含量 118

实验七　Folin-酚试剂法测定蛋白质含量 120

实验八　紫外分光光度法测定蛋白质含量 122

实验九　考马斯亮蓝G-250染色法测定蛋白质含量 124

实验十　细胞核的分离纯化及核酸测定 126

第八章　碱性磷酸酶的活性及动力学分析 133

实验一　碱性磷酸酶的分离纯化与比活性测定 133

实验二　碱性磷酸酶的动力学分析 139

第九章　血液中若干指标的测定 146

实验一　血糖测定及激素对血糖浓度的影响 146

实验二　血清甘油三酯的测定 150

实验三　血清丙氨酸氨基转移酶测定 154

实验四　血清尿素测定 157

实验五　胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇 160

第三篇　分子生物学实验

第十章　分子生物学基本实验 164

实验一　质粒DNA的提取 164

实验二　琼脂糖凝胶电泳检测DNA及DNA的纯化回收 167

实验三　聚合酶链式反应（PCR）体外扩增DNA 170

实验四　DNA的限制性内切酶消化与DNA连接反应 173

实验五　感受态细胞制备及重组质粒转化 175

实验六　目的基因在大肠杆菌中的诱导表达 178

第十一章  探究性实验 181

实验一　PCR扩增目的基因 181

实验二　大肠杆菌感受态细胞的制备 183

实验三　质粒DNA的转化 184

参考文献 186

附　录 187

附录一　实验室常用试剂、缓冲液的配制方法 187

附录二　常用培养基及抗生素的配制方法 195

附录三　生物化学与分子生物学常用数据 196

附录四　生物化学与分子生物学网上资源、数据库及国内外期刊 203